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禄青青，Basit Abdul, Paing OO Kyaw, 陈天娜，祁子航

非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪和各种野猪引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，又称非洲猪瘟疫或疣猪病，临床以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血、高死亡率为特征。2018年8月，我国确诊首例ASF病例，随后疫情蔓延全国，给国内养猪产业造成不可估量的经济损失。与其他动物疫病相比，ASF 尚无安全有效的疫苗和治疗药物，因此，如何做到早期、快速，高效、特异地检测ASFV，使病毒扼杀在传播初期，这对ASF的防控具有重要意义。
其中D117L基因编码p17蛋白，是 ASFV 主要的内膜／衣壳蛋白，与B6 46L、CP20 4L、E183L 基因等一样，序列高度保守。近年来，随着对ASFV检测技术的研究不断深入，D117L 基因显示出作为检测靶标的重要性。即时检测（point-of-care testing, POCT）技术，对诊断疾病和测试食品安全等领域有重大意义。本研究根据 ASFV 结构蛋白D117L 基因结合重组酶聚合酶扩增（RPA）和侧向流 试纸条（LFS），开发了新型 CRISPR-LbCas 12a/LwCas13a 反应系统生物传感器检测方法。这些方法在37°恒温进行可视化检测，具有高灵敏性和特异性，其灵敏度可达2个基因拷贝数，与传统的q PCR相比符合率达100%。整个过程无需专业技术人员和复杂仪器，可用于早期病毒核酸检测，成为目前应用最为广泛的POCT技术之一。
综上，本研究开发了一种简便、快速、现场可视化检测ASFV的方法。